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用途核黃素存在綠色蔬菜、黃豆、稻谷、小麥、酵母、肝、心及乳類中，核黃素在體內分布于各組織中，構成體內遞補氫化系中的輔酶，參與氧化還原反應，起傳遞氫原子的作用。當核黃素缺乏時，就會影響生物氧化，使代謝發生障礙，引起的多發生于口、眼、外生殖器，如、、、陰囊炎等。核黃素主要用作醫藥、食品添加劑和飼料添加劑，在藥用方面，用于復合維生素或維生素B2制劑，還用作糖衣片和膠囊的黃色著色劑。在用作食品添加劑時，一方面有強化營養的作用，另一方面也作為黃色Chemicalbook著色劑。大鼠腹腔注射LD50為560mg/kg。用途維生素B2做對照用用途用法與功能：為體內黃酶類輔基的組成部分(黃酶在生物氧化還原中發揮遞氫作用)，當缺乏時，就影響機體的生物氧化，使代謝發生障礙。生產方法有很多合成方法，但以3，4-二甲基苯胺（見C8H11N，[95-64-7]）與D-核糖縮合，經催化氫化后與苯胺偶合，再與巴比妥酸環合制得核黃素的方法較好。生產方法D-核糖與3，4-二甲基苯胺經縮合、催化氫化得核糖胺，后者與重氮鹽偶合、巴比妥酸環合即得本品。